在利用細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)細(xì)胞的時候,我們經(jīng)常要涉及到換液操作,其實就是去掉舊的培養(yǎng)液,換入新鮮的培養(yǎng)液,那么換液的具體步驟是怎樣的,我們需要注意什么呢?
1.操作盡量往里。盡量伸進去超凈工作臺一點,因為越是接近工作臺邊緣,細(xì)菌飄進的機會就增加,哪怕是有無菌風(fēng)。
2.裝培養(yǎng)液的瓶子和裝胰酶的試管打開塞子前要用酒精擦,火上烤干再打開。開口后,最好開口向操作者傾斜放在架子上。這樣你吸取液體的時候就不用一只手拿著瓶子(試管)了。
3.永遠(yuǎn)不能在開口正上方操作。吸取液體時,培養(yǎng)液瓶或胰酶試管開口保持傾斜,移液管也是傾斜插入瓶內(nèi)。如果開口就垂直向上,你也必須垂直插入移液管,那么手上或吸耳球上就有可能有一兩個細(xì)菌垂直掉進瓶內(nèi)。還有,取器材時,手要“繞彎”避免在瓶子開口上方空中經(jīng)過。
4.吸放最好一次完成。比如吸掉舊的培養(yǎng)液時最好一次吸完。如果液體比較多,要分幾次吸時,移液管口不能接觸廢液缸。吸取新鮮培養(yǎng)液到細(xì)胞培養(yǎng)瓶時,管口不要接觸瓶子,要在瓶口吹進去。因為如果接觸到瓶子,管口就可能帶有細(xì)胞,如果再放到培養(yǎng)液瓶里面去繼續(xù)吸的話,培養(yǎng)液就會被細(xì)胞污染。當(dāng)然,吸夠新鮮培養(yǎng)液后還要吹打,這時就可以接觸,只要你不再吸培養(yǎng)液的話。
5.移液管要套上一個吸耳球,套球時要注意,左手拿管,右手拿球套上去。關(guān)鍵是左手拿管的位置。不能拿管口部分,應(yīng)該盡量靠上。
6.一般移液管使用前要在酒精燈上烤一下,就是所謂“過火”。但切記不能烤得太燙,稍微過一下就行了。
以上是細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)細(xì)胞時的換液步驟及注意事項,你學(xué)會了嗎?