我們在細胞培養(yǎng)的過程中,為了減少細胞代謝從而達到長期儲存的目的,或者需要進行對照試驗時就使用凍存管將細胞進行凍存起來,但是我們在使用凍存管時總會遇到一些問題,富道細胞根據(jù)客戶使用情況整理了一下使用凍存管凍存細胞的注意事項,會從細胞凍存時機、細胞凍存數(shù)量、凍存管的選擇、溫度多個方面進行說明:
使用凍存管凍存細胞時的時機需要掌握好,如果細胞狀態(tài)不好如:培養(yǎng)液變得很黃了或者細胞被污染甚至開始凋亡或崩解進行凍存后肯定是不行。我們應(yīng)該在細胞細胞增殖旺盛,情況穩(wěn)定,試驗效果良好,復(fù)蘇后兩周內(nèi),進行凍存細胞。
細胞凍存數(shù)量也需要進選擇好,如果凍存時細胞濃度低于1-5×1000,000/ml復(fù)蘇就很難成功了。所以我們要在離心之后調(diào)整進行凍存的細胞濃度,但是不要重新洗細胞。
我們在凍存管的選擇上要選擇正規(guī)廠家的耗材且凍存管的蓋子一定要擰緊,否則復(fù)蘇水浴時會滲水,造成污染。選擇原配的管子和蓋子(不同牌子/型號的顏色會有差別)。
前期準備工作準備好之后我們在使用凍存管進行凍存之后還需要注意在逐步凍存的時候不要在-80度的時間太長且要定期測量液氮儲備,保證細胞全部浸在液面下。
這就是富道細胞在分享的一些使用凍存管凍存細胞時的注意事項了,希望對大家有所幫助。
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