讓細胞更好地貼壁是保證其后期正常生長的關鍵,有時候我們會遇到細胞培養(yǎng)瓶內的細胞不好貼壁的情況,通過以下方法可以更好地促進細胞貼壁生長。
1、提高接種密度:細胞主要是通過自身分泌的細胞外基質來貼附在支持物表面生長,如果細胞貼壁情況不好可能是接種數(shù)目太少,無法分泌足夠的細胞外基質,可以通過增加接種密度來提高貼壁效果。
2、增加貼壁因子:血清中含有促貼壁因子,而無血清培養(yǎng)體系中由于缺少這種成分,細胞的貼壁效果會下降很多??梢赃m當添加一些血清來促進細胞貼壁。
3、提高接種細胞質量:細胞本身的狀態(tài)也會影響其貼壁效果,在接種前確認細胞狀態(tài)良好,不要選用已經(jīng)老化的細胞。
4、選用TC處理的耗材:細胞培養(yǎng)瓶是貼壁細胞培養(yǎng)常用的耗材,這種耗材分為TC處理和非TC處理表面兩種類型,在選擇耗材的時候要選擇經(jīng)過TC處理的產(chǎn)品,這樣的產(chǎn)品在表面引入了親水團,更利于細胞貼壁生長。
此外,細胞貼壁不良也有可能是引入了其他污染源,如細菌、真菌、支原體等,操作人員要注意嚴格執(zhí)行無菌操作規(guī)程,避免污染細胞。
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