細(xì)胞培養(yǎng)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境,使細(xì)胞生存、生長、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細(xì)胞培養(yǎng)瓶是貼壁細(xì)胞培養(yǎng)常用的一種細(xì)胞耗材,在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,我們經(jīng)常會(huì)發(fā)現(xiàn)液體中出現(xiàn)一些雜質(zhì)積淀,出現(xiàn)這種情況的原因是多方面的,溫度也是其中常見的一種原因。
細(xì)胞培養(yǎng)瓶中出現(xiàn)沉淀有可能是細(xì)胞產(chǎn)生了污染,如果排除污染,細(xì)胞培養(yǎng)基中的渾濁通常被解釋為金屬元素、蛋白和其他培養(yǎng)基組分的沉淀。沉淀物大多損害細(xì)胞正常增殖,因?yàn)樗麄兺ㄟ^螯合吸取培養(yǎng)基養(yǎng)分和其他需要的組分,從而改變培養(yǎng)基的組成。沉淀物可通過顯微鏡觀察,可能會(huì)干擾需要成像分析的實(shí)驗(yàn)。
在細(xì)胞培養(yǎng)中,溫度是引起沉淀的主要因素之一。當(dāng)所處溫度發(fā)生極端變化時(shí),從溶液中會(huì)析出高分子量血漿蛋白;熱失活和凍融循環(huán)能促進(jìn)蛋白降解和沉淀;因?yàn)橐后w或重組成培養(yǎng)基在使用之間保持冷藏儲(chǔ)存,鹽可能沉淀,尤其是10x或其他濃縮的儲(chǔ)存液。
當(dāng)然,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中出現(xiàn)沉淀,若確定是溫度原因,需要注意培養(yǎng)基的儲(chǔ)存環(huán)境及操作方法,避免反復(fù)凍融,這樣可以降低沉淀的出現(xiàn)概率。