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液體菌種是用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)而成的菌種它具有菌種生產(chǎn)周期短、菌齡整齊一致、接種方便、適宜于工廠化生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)，因而受到了廣大栽培者的歡迎。細(xì)胞搖瓶是培養(yǎng)液體菌種時(shí)需要用到的一種耗材，在培養(yǎng)時(shí)需要注意以下要點(diǎn)：

1.培養(yǎng)基的配制 按配方稱好各種成分，裝入容器中，加水溶解后，分裝入三角瓶中，一般250～300mL細(xì)胞搖瓶裝50mL培養(yǎng)液，500mL三角瓶裝100mL培養(yǎng)液，塞上棉塞，用報(bào)紙包扎；也可用8層紗布做成8cm×8cm的瓶塞封口，外面用牛皮紙封口。

2.滅菌一般采用高壓滅菌方法，滅菌要求121℃、30min。取出冷卻到30℃左右，放人無菌室或接種箱內(nèi)備用。

3.接種 按無菌操作要求每瓶接入2～3cm2的斜面菌種一塊，每支斜面菌種可接4～5瓶。接入的菌種稍帶點(diǎn)培養(yǎng)基為好，能使其浮在培養(yǎng)基的表面，接種后用原塞瓶口的紗布展開后蓋在瓶口，并用線繩扎牢。

4.培養(yǎng)接種好的菌種瓶可置于搖床上培養(yǎng)，也可置于24～26℃恒溫下靜置培養(yǎng)48h后，待氣生菌絲延伸到培養(yǎng)液中后再進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。往復(fù)式搖床的振蕩頻率為80～120r/min，旋轉(zhuǎn)式搖床的頻率為150～220r/min，搖床培養(yǎng)3～4d即可。培養(yǎng)結(jié)束時(shí)，因菌種不同，培養(yǎng)液出現(xiàn)不同色澤，如平菇、金針菇的培養(yǎng)液呈淺黃色；香菇、猴頭菇的培養(yǎng)液呈紅棕色，并有菇香味；木耳的培養(yǎng)液呈褐色，黏稠有香甜味。培養(yǎng)液經(jīng)檢測(cè)，無雜菌污染，菌絲干重達(dá)10g/L，菌絲球直徑在1～2mm時(shí)，方可用于生產(chǎn)或進(jìn)一步擴(kuò)大培養(yǎng)。

5.二級(jí)液體菌種制作 二級(jí)液體菌種培養(yǎng)基的制作同一級(jí)液體菌種，培養(yǎng)容器要大些，裝量不超過3500mL。滅菌冷卻后，將已經(jīng)發(fā)酵好的一級(jí)液體菌種按5%～10%的比例接入5L細(xì)胞搖瓶中，置搖床上培養(yǎng)，轉(zhuǎn)速要適當(dāng)慢些。經(jīng)過一定時(shí)間的振蕩培養(yǎng)，就可得到菌球均勻分布、發(fā)酵液清澈透明的液體菌種。

綜上所述，利用細(xì)胞搖瓶培養(yǎng)液體菌種時(shí)按照以上方法操作，在過程中注意控制溫度、搖床震蕩頻率等因素，確保培養(yǎng)效果。