血清是細(xì)胞生長(zhǎng)所需的一種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),其中以胎牛血清的品質(zhì)較好。這是因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分少。在使用血清時(shí)我們經(jīng)常要將血清分裝到培養(yǎng)基瓶中,具體如何分裝呢?
胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體,由于其用途比較特殊,如果分裝過(guò)程中不注意很容易引入各種污染源,細(xì)胞培養(yǎng)使用受污染的血清就會(huì)影響細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。所以在分裝胎牛血清時(shí)一定要按照規(guī)定步驟進(jìn)行操作:
滅活:水浴鍋,56℃,30分鐘,并且隨時(shí)搖晃均勻。取出,立即放在冰上冷卻,自然冷卻至室溫(約需1-3小時(shí))。在熱滅活過(guò)程中,定時(shí)適當(dāng)搖動(dòng)可以減少沉淀現(xiàn)象的發(fā)生。
無(wú)菌分裝:轉(zhuǎn)入無(wú)菌間,在超凈臺(tái)內(nèi)將血清分裝入50-100ml培養(yǎng)基瓶中封口,并于-20℃保存?zhèn)溆?。在分裝時(shí)要注意:① 預(yù)先要將血清輕輕搖動(dòng)數(shù)周、混勻;② 用吸液管吹出血清時(shí)要注意:③ 不要吹出氣泡,血清很粘稠,很容易產(chǎn)生氣泡。如果產(chǎn)生氣泡,則在酒精燈火焰上過(guò)一下。
以上是胎牛血清分裝到培養(yǎng)基瓶的具體步驟及注意事項(xiàng),此外在操作時(shí)工作人員一定要做好自身的消毒工作,避免因?yàn)椴僮鞑划?dāng)對(duì)血清造成污染。