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我們在培養(yǎng)細(xì)胞時最怕出現(xiàn)的情況之一就是細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)污染的情況，今天富道細(xì)胞來跟大家簡單分享一下細(xì)胞工廠污染的幾種表現(xiàn)及補(bǔ)救方法。

1. 細(xì)菌污染：細(xì)胞工廠中如果出現(xiàn)細(xì)菌污染的話，具體情況表現(xiàn)為：細(xì)胞工廠在倒置顯微鏡下培養(yǎng)基內(nèi)有黑色細(xì)沙狀，且因為細(xì)胞工廠內(nèi)細(xì)胞感染細(xì)菌的不同，會出現(xiàn)有不同的外形并導(dǎo)致細(xì)胞工廠里面的細(xì)胞培養(yǎng)基液體出現(xiàn)渾濁變黃的跡象，會明顯對細(xì)胞工廠內(nèi)細(xì)胞生長影響。

如果出現(xiàn)細(xì)菌污染情況我們需要對培養(yǎng)細(xì)胞所需器皿的滅菌情況進(jìn)行仔細(xì)檢查，在高壓滅菌時放氣時間、壓力是否足足夠，特別是用于儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等細(xì)胞培養(yǎng)耗材，如果出現(xiàn)連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染?？梢栽谙麓问褂门囵B(yǎng)液前檢查是否內(nèi)部存在渾濁的現(xiàn)象，并根據(jù)此現(xiàn)象添加相應(yīng)的抗生素處理。

2. 霉菌污染：細(xì)胞工廠內(nèi)如果出現(xiàn)霉菌污染的話具體表現(xiàn)為：內(nèi)部培養(yǎng)基是清亮的且在倒置顯微鏡觀察下是沒有明顯雜質(zhì)，在37度恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)2-3天，基液依舊清亮，但是內(nèi)部會有絮狀雜質(zhì)呈現(xiàn)，且鏡下觀察內(nèi)部可發(fā)現(xiàn)有細(xì)絲狀的團(tuán)狀漂浮物，有明顯的菌絲現(xiàn)象，雖然細(xì)胞工廠內(nèi)細(xì)胞仍可生長，但時間長之后細(xì)胞會出現(xiàn)狀態(tài)變差。

那我們可以采用硫酸銅溶液來擦拭CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，后在水盤里也需要加上適度飽和量的硫酸銅。也可以在培養(yǎng)箱中托盤加入飽和的消毒磷酸氫二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。

3. 支原體污染：支原體污染的癥狀為黑色且形狀為多形，細(xì)胞工廠內(nèi)培養(yǎng)基會有渾濁現(xiàn)象，由于血清檢測項目中很少包涵支原體陰性檢測，且支原體是牛血清中最常見的微生物之一并不能采用過濾的辦法除去。支原體感染細(xì)胞以后，細(xì)胞病變不很明顯，只是慢慢死去。

而出現(xiàn)這種現(xiàn)象可以可以采用獸用支原體病的藥，但可用于細(xì)胞培養(yǎng)，無任何不良反應(yīng)。使用時用50ug/ml Tylosin培養(yǎng)液培養(yǎng)6天或連續(xù)傳兩代即可清除支原體污染。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度。

這就是細(xì)胞工廠污染的幾種表現(xiàn)及補(bǔ)救方法，富道細(xì)胞也希望可以幫到大家。