富道細(xì)胞在之前已經(jīng)簡(jiǎn)單描述過(guò)了細(xì)胞工廠內(nèi)如果出現(xiàn)支原體污染的特征和表現(xiàn)方式,因?yàn)槿绻?xì)胞工內(nèi)細(xì)胞被支原體污染,細(xì)胞工廠內(nèi)培養(yǎng)基一般情況下不會(huì)出現(xiàn)渾濁狀態(tài),那我們可以通過(guò)這四種檢測(cè)方式:
1.利用相差顯微境檢測(cè)支原體污染
將細(xì)胞工廠內(nèi)懷疑被支原體污染的細(xì)胞按種放在蓋玻片上,靜置一天后取出在使用相差油鏡進(jìn)行輔助觀察細(xì)胞狀態(tài),之前簡(jiǎn)單介紹過(guò)了支原體的呈現(xiàn)形狀,如果細(xì)胞工廠內(nèi)細(xì)胞被支原體污染,那么進(jìn)行觀察后就會(huì)發(fā)現(xiàn)在細(xì)胞表面和細(xì)胞與細(xì)胞直接有一些暗色微小的顆粒在做不規(guī)則的運(yùn)動(dòng)。
2.熒光染色法
DNA熒光染色法是利用熒光染色劑雙苯咪唑Hoechst33258能夠結(jié)合支原體DNA中的A-T堿基富集區(qū)域的原理,被支原體污染的細(xì)胞經(jīng)染色后,其細(xì)胞核外與細(xì)胞周圍可看到許多大小均一的熒光點(diǎn),即是富含A-T堿基區(qū)域的支原體DNA。
3.電鏡檢查
用掃描電鏡方法簡(jiǎn)便快速一般細(xì)胞工廠中的細(xì)胞培養(yǎng)48~72小時(shí),細(xì)胞接近匯合前,用胰酶消化細(xì)胞制成細(xì)胞懸液后進(jìn)行固定、包埋、切片后才能進(jìn)行觀察,也可以利用透射電鏡。
4.DNA分子條文檢查或支原體培養(yǎng)等方法
檢出率高,但方法較為復(fù)雜。