我們?cè)谑褂?a title="細(xì)胞搖瓶,三角搖瓶" href="../../gsyp/17.html" target="_blank" rel="noopener">細(xì)胞搖瓶培養(yǎng)HEK293細(xì)胞時(shí),肉眼觀察不到結(jié)團(tuán),但是在細(xì)胞計(jì)數(shù)儀上會(huì)觀察到細(xì)胞有幾個(gè)黏連,似葡萄狀相連的現(xiàn)象。在出現(xiàn)這種現(xiàn)象時(shí)我們注意以下幾點(diǎn):
第一,使用細(xì)胞搖瓶換液時(shí)動(dòng)作要輕。
第二,293細(xì)胞在低代時(shí)容易貼壁,生長(zhǎng)良好,在傳到幾十代以后,易聚集成團(tuán),且貼壁不牢,用PBS沖洗時(shí)即可能脫落,即使消化后也不容易吹打成單細(xì)胞懸液。
第三,剛復(fù)蘇的293貼壁很慢,復(fù)蘇接種后24小時(shí)內(nèi),應(yīng)盡量減少觀察細(xì)胞次數(shù)或不作觀察,以免因晃動(dòng)而影響細(xì)胞貼壁。復(fù)蘇后48小時(shí)左右觀察貼壁情況并進(jìn)行首次更換培養(yǎng)基比較合適。
當(dāng)然也有可能是消化過(guò)渡引起細(xì)胞損傷,釋放引起聚團(tuán)的組物質(zhì)。
1、消化得時(shí)候盡量溫和些;
2、細(xì)胞離心速度不宜過(guò)大或時(shí)間過(guò)長(zhǎng);
3、傳代得時(shí)候保證吹打均勻。
這就是我們?cè)谑褂?a title="細(xì)胞搖瓶,三角搖瓶" href="../../gsyp/17.html" target="_blank" rel="noopener">細(xì)胞搖瓶培養(yǎng)HEK293細(xì)胞時(shí),肉眼觀察不到結(jié)團(tuán),但是在細(xì)胞計(jì)數(shù)儀上會(huì)觀察到細(xì)胞有幾個(gè)黏連,似葡萄狀相連的現(xiàn)象。在出現(xiàn)這種現(xiàn)象時(shí)我們注意的幾點(diǎn)方法了。