富道細(xì)胞跟大家分享一下如何利用細(xì)胞工廠進(jìn)行細(xì)胞傳代,首先我們?cè)趯?duì)細(xì)胞工廠內(nèi)細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞傳代前首先要吸除或倒掉細(xì)胞工廠中的舊培養(yǎng)液。后需用清洗液液洗2~3次。后續(xù)在細(xì)胞工廠內(nèi)加入適量消化液(胰蛋白酶或與EDTA混合液)輕輕搖動(dòng)細(xì)胞工廠,使消化液流遍細(xì)胞工廠內(nèi)的所有細(xì)胞表面。
然后吸掉或倒掉細(xì)胞工廠內(nèi)的消化液后再加適量新的消化液,輕輕搖動(dòng)細(xì)胞工廠再倒掉大部分消化液,僅留少許進(jìn)行消化(也可不采用上述步驟直接加消化液進(jìn)行消化)。
我們?cè)趯?duì)細(xì)胞工廠內(nèi)細(xì)胞進(jìn)行消化時(shí)最好在37℃或室溫25℃以上環(huán)境下進(jìn)行。消化2~5 min 后把細(xì)胞工廠放置在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞工廠內(nèi)胞質(zhì)回縮,細(xì)胞間隙增大后,應(yīng)立即終止消化,之后我們?cè)傥虻沟粝?,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞工廠把殘留消化液沖掉。再加培養(yǎng)液。如僅用胰蛋白酶可直接加少許含血清的培養(yǎng)液,終止消化,吸取細(xì)胞工廠內(nèi)培養(yǎng)液,反復(fù)輕輕晃動(dòng)細(xì)胞工廠內(nèi)壁細(xì)胞,使細(xì)胞脫離瓶壁后形成細(xì)胞懸液。此動(dòng)作要輕柔不要用力過(guò)猛,之后在計(jì)數(shù),分別接種在新的細(xì)胞工廠內(nèi)。
這就是富道細(xì)胞跟大家分享的如何利用細(xì)胞工廠進(jìn)行細(xì)胞傳代了,希望對(duì)大家有所幫助。