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今天富道細(xì)胞來跟大家分享一下如何利用凍存管進(jìn)行細(xì)胞凍存實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞凍存是指對(duì)體外培養(yǎng)的細(xì)胞通過加入液氮進(jìn)行保護(hù)。以維持其各種生物特性，減少培養(yǎng)器皿、培養(yǎng)液等的消耗

細(xì)胞的凍存實(shí)驗(yàn)的基本原理是利用液氮的低溫特性以及二甲亞砜（DMSO）或甘油這兩種無毒性的物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞中，使細(xì)胞內(nèi)冰點(diǎn)下降，并可提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性，配合以緩慢冷凍的方法，可使細(xì)胞內(nèi)的水分逐步地滲透出胞外。那我們知道其原理之后就跟大家分享一下其具體步驟吧：

首先我們依照傳代的方法用 0.25% 胰蛋白酶液對(duì)處于對(duì)數(shù)生長期的單層細(xì)胞進(jìn)行消化。收集消化細(xì)胞于離心管中，800～1000 r/min 離心 5 min。然后棄上清液，加入適量凍存液，用吸管吹打細(xì)胞制懸，調(diào)整細(xì)胞密度為 5 x 106～1 x 107 個(gè)/ml。后續(xù)將每個(gè)凍存管分裝細(xì)胞懸液 1 ml，旋緊凍存管的蓋，并用蠟?zāi)し鈬?yán)。在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱、凍存時(shí)間、凍存人名等。然后將將凍存管置于如下條件下逐步加以凍存：4 ℃，1 h→- 20 ℃，2 h→- 85 ℃，2 h→液氮。

以上步驟就是富道細(xì)胞來跟大家分享一下如何細(xì)胞的利用凍存管進(jìn)行細(xì)胞凍存實(shí)驗(yàn)的方法了，希望對(duì)大家有所幫助。