細(xì)胞的體外培養(yǎng)需要特定的環(huán)境,如無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等。細(xì)胞接種存活率是衡量細(xì)胞生存能力的重要細(xì)胞,那么,我們怎樣利用細(xì)胞培養(yǎng)瓶檢測這一指標(biāo)呢?
細(xì)胞接種存活率又稱細(xì)胞貼壁率。它是細(xì)胞被制成分散的懸液后,以低密度(2~5個細(xì)胞/cm2)被接種到底物上,貼壁并能存活生長形成細(xì)胞小群(克隆)的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)值,用以表示細(xì)胞的生存能力和細(xì)胞群的活力?;静襟E如下:
(1)取對生長期細(xì)胞,用消化法制成細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后按檢測細(xì)胞生長曲線的接種細(xì)胞的原則,將細(xì)胞接種于細(xì)胞培養(yǎng)瓶(濃度相對高些)。接種12~15瓶。
(2)每2小時取出一瓶細(xì)胞,倒掉培養(yǎng)液,然后加入胰酶消化已貼壁細(xì)胞,計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,用下面公式逐個計(jì)算每個時間上的貼壁率。每2小時一次,共觀察24小時即12。接種存活率%(貼壁率)=(貼壁存活細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù))×100%。
細(xì)胞培養(yǎng)瓶是貼壁類細(xì)胞培養(yǎng)常用的容器,細(xì)胞接種存活率僅僅是衡量細(xì)胞生長狀況的一方面,其他還包括克隆形成率、細(xì)胞分裂指數(shù)等,這些都可以直接反映細(xì)胞的狀態(tài)。