細(xì)胞培養(yǎng)瓶一般由聚苯乙烯原料制成,具有高透明度,在貼壁細(xì)胞培養(yǎng)中應(yīng)用比較多。除了作為細(xì)胞培養(yǎng)常用耗材外,它還可以用于A2780(人卵巢癌細(xì)胞)的儲存。
A2780人卵巢癌細(xì)胞系來自未治療患者的腫瘤組織,一般用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用。這種細(xì)胞通常會選用T75細(xì)胞培養(yǎng)瓶作為其運(yùn)輸與儲存的容器,收到細(xì)胞后再近些細(xì)胞的復(fù)蘇、傳代、凍存等操作。
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將細(xì)胞在37度水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入細(xì)胞培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。凍存時棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml FBS培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以上是細(xì)胞培養(yǎng)瓶在A2780人卵巢癌細(xì)胞中的應(yīng)用,在操作時全程要注意無菌操作,避免對細(xì)胞造成污染。