細(xì)胞污染是令許多實(shí)驗(yàn)人員非常頭疼的事情,輕則影響細(xì)胞生長(zhǎng),嚴(yán)重了必須丟棄細(xì)胞重新培養(yǎng),嚴(yán)重影響試驗(yàn)進(jìn)程。其實(shí),細(xì)胞搖瓶培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),如果注意操作,有些污染是可以避免的。
1.實(shí)驗(yàn)用品防止污染。細(xì)胞培養(yǎng)所用試劑、細(xì)胞搖瓶、器材的清洗、消毒要徹底,各種溶液滅菌要仔細(xì),并在無(wú)菌實(shí)驗(yàn)檢測(cè)陰性后才能使用。操作室及剩余的無(wú)菌器材要定期清潔、消毒、滅菌。
2.操作過(guò)程防止污染。穿著容易起靜電或吸附灰塵的衣物必須更換為白大褂后才能進(jìn)入細(xì)胞間。
3.實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前需要確定戴的手套沒(méi)有問(wèn)題,只要接觸過(guò)生物安全柜之外的物品,必須及時(shí)對(duì)手套進(jìn)行消毒。
4.進(jìn)入細(xì)胞培養(yǎng)間后關(guān)好門,坐下來(lái)盡量少走動(dòng)以免影響生物安全柜的風(fēng)簾。工作開(kāi)始前要先用75%酒精棉球擦手和瓶蓋。事先要嚴(yán)格檢查所用的器材、溶液和細(xì)胞,不要把污染品或未經(jīng)消毒的物品帶入無(wú)菌室內(nèi),更不能隨便使用,以免造成大規(guī)模污染。
5.細(xì)胞操作時(shí)動(dòng)作要輕,必須在火焰周圍無(wú)菌區(qū)內(nèi)打開(kāi)瓶口,并將瓶口放在火焰周圍簡(jiǎn)單轉(zhuǎn)動(dòng)燒灼,注意不要讓火焰把塑料瓶口燒化。
6.實(shí)驗(yàn)操作時(shí)生物安全柜的隔板要盡可能放低,盡量減少談話,打噴嚏或咳嗽時(shí)絕對(duì)不能對(duì)著工作區(qū),以免造成不必要的污染。
7.細(xì)胞搖瓶瓶蓋應(yīng)當(dāng)?shù)狗旁谶h(yuǎn)離自己的地方,以避免瓶蓋被誤操作所污染。
8.不要從敞開(kāi)的容器口上方經(jīng)過(guò),以避免衣服上掉落不明物體對(duì)細(xì)胞的污染。
做到以上這些,可以在很大程度上避免細(xì)胞搖瓶?jī)?nèi)的細(xì)胞出現(xiàn)污染。此外,操作時(shí)要注意及時(shí)更換習(xí)慣、移液槍槍頭、移液管等耗材,切勿一根管子做到底,一旦發(fā)現(xiàn)接觸了非潔凈或者無(wú)法確定潔凈的物品必須直接丟棄。