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細胞培養(yǎng)試驗對環(huán)境、耗材等有嚴格的要求，如果細胞培養(yǎng)瓶中含有細菌內(nèi)毒素，將影響細胞的生長甚至導致死亡。那么，我們該如何檢測細菌內(nèi)毒素呢？

細菌內(nèi)毒素是革蘭氏陰性菌的細胞壁成分，當細菌死亡或自溶后便會釋放出內(nèi)毒素。是G-菌細胞壁個層上的特有結(jié)構(gòu)，內(nèi)毒素為外源性致熱原，它可激活中性粒細胞等，使之釋放出一種內(nèi)源性熱原質(zhì)，作用于體溫調(diào)節(jié)中樞引起發(fā)熱。

檢測細胞培養(yǎng)瓶中是否含有細菌內(nèi)毒素可以聽過內(nèi)毒素檢測鱟試劑盒來檢測，它是利用人工合成的顯色基質(zhì)使鱟試劑產(chǎn)生的顯色反應定量檢測內(nèi)毒素。在適宜的條件下(溫度,pH值及無干擾物質(zhì)),細菌內(nèi)毒素激活C因子,引起一系列酶促反應,激活凝固酶原形成凝固酶,凝固酶分解人工合成的顯色基質(zhì),使其分解為多肽和黃色的對硝基苯胺(pNA,λmax = 405nm) 。在一定時間內(nèi),pNA的生成量與細菌內(nèi)毒素濃度成正相關(guān),據(jù)此,可以定量供試品的內(nèi)毒素濃度。

以上是檢測細胞培養(yǎng)瓶中細菌內(nèi)毒素的方法，確保耗材無細菌內(nèi)毒素是衡量其質(zhì)量的一項重要指標，也是保證后期細胞正常生長的關(guān)鍵因素。