細胞經(jīng)常會有需要凍存和復蘇的,富道細胞之前跟大家介紹了凍存管凍存細胞的操作流程,今天跟大家分享一下復蘇凍存管內細胞的方法,首先我們要知道細胞復蘇時速度要快,使之迅速通過細胞最易受損的-5~0℃,細胞仍能生長,活力受損不大。
1、準備一個1000ml的燒壞,內裝2/3杯37℃的溫水。
2、從液氮中取出凍存管、迅速置于溫水中并不斷攪動。使凍存管中的凍存物在1分鐘之內融化。
3、打開凍存管,將細胞懸液吸到離心管中。
4、1000rpm離心10分鐘,棄去上清液。
5、沉淀加10ml培養(yǎng)液,吹打均勻,再離心10分鐘,棄上清液。(細胞數(shù)量少的情況下,復蘇時可省略步驟5。)
6、加適當培養(yǎng)基后將細胞轉移至細胞培養(yǎng)瓶中,37℃培養(yǎng),第二天觀察生長情況。
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