在利用細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中,我們會(huì)遇到各種各樣的狀況,細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢就是其中的一類(lèi)。那么,出現(xiàn)這種情況的原因是什么,又該如何解決呢?
細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢的原因是多方面的,主要包括以下幾點(diǎn):
1.由于更換不同培養(yǎng)液或血清;
2.培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必須成分如谷氨酰胺或生長(zhǎng)因子耗盡或缺乏或已被破壞;
3.培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;
4.試劑保存不當(dāng);
5.接種細(xì)胞起始濃度太低;
6.細(xì)胞已老化;
7.支原體污染。
解決方案:
1.比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清支持細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn),讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;
2.換入新鮮配置培養(yǎng)液,或補(bǔ)加谷氨酰胺及生長(zhǎng)因子;
3.用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,丟棄培養(yǎng)物;
4.血清需保存在-10到-20℃。培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存。含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,需在1周內(nèi)用完;
5.增加細(xì)胞培養(yǎng)瓶中接種細(xì)胞起始濃度;
6.換用新的保種細(xì)胞;
7.分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。
總之,如果細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢不要恐慌,找到原因之后,我們就可以根據(jù)具體原因制定解決方案。