在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),血清是一種必不可少的營養(yǎng)物質(zhì),它為細(xì)胞的生長提高粘附因子、生長因子、結(jié)合蛋白等。在使用血清時(shí),我們會涉及到血清的分裝操作,那么,應(yīng)該如何將其分裝到PETG血清瓶呢?
1、化凍
將血清從-20度冰箱中取出,室溫(或浸于自來水中)化凍(約需要30分鐘至2小時(shí),也可放于4度冰箱化凍過夜;化凍后若不馬上滅活,可以放入4度冰箱中暫時(shí)保存)。
2、滅活
水浴鍋,56℃,30分鐘,并且隨時(shí)搖晃均勻。取出,立即放在冰上冷卻,自然冷卻至室溫(約需1-3小時(shí))。在熱滅活過程中,定時(shí)適當(dāng)搖動可以減少沉淀現(xiàn)象的發(fā)生。
3、分裝
轉(zhuǎn)入無菌間,在超凈臺內(nèi)將血清分裝入50-100ml PETG血清瓶中封口,并于-20℃保存?zhèn)溆?。在分裝時(shí)要注意:預(yù)先要將血清輕輕搖動數(shù)周、混勻; 用吸液管吹出血清時(shí)要注意: 不要吹出氣泡,血清很粘稠,很容易產(chǎn)生氣泡。如果產(chǎn)生氣泡,則在酒精燈火焰上過一下。
以上是血清分裝的具體操作步驟,注意不要將手放在敞開的瓶口上方,分裝速度要快,避免沉降菌掉落入PETG血清瓶瓶口處。