作為一種多層結(jié)構(gòu)的細(xì)胞培養(yǎng)容器,細(xì)胞工廠收獲細(xì)胞時相較于普通的容器要復(fù)雜,而收獲細(xì)胞又是關(guān)系到試驗(yàn)效果的重要環(huán)節(jié)。注意以下這五點(diǎn),收獲細(xì)胞穩(wěn)穩(wěn)的。
1、棄去培養(yǎng)液后使用無鈣無鎂磷酸鹽緩沖液(CMF-PBS)清洗細(xì)胞工廠(40~50 mL/層),若有需要重復(fù)清洗一次,確保將殘留的培養(yǎng)液清洗干凈。
2、加入消化液平均分布到每層(10~40 mL/層),輕輕前后左右傾斜培養(yǎng)器,確保消化液完全浸過培養(yǎng)面,細(xì)胞出現(xiàn)間隙時,棄去消化液,輕輕拍擊容器幫助細(xì)胞從生長面脫離。
3、由于是多層結(jié)構(gòu),不能清晰觀察中間層的細(xì)胞消化狀態(tài),建議參照完全相同培養(yǎng)條件下的培養(yǎng)瓶 或單層容器的消化狀態(tài)?;蚴褂脤S玫亩鄬蛹?xì)胞培養(yǎng)器觀察臺來觀察每層細(xì)胞的生長狀態(tài)。
4、若細(xì)胞懸液收集完成后,培養(yǎng)層仍存在大量細(xì)胞,則需要清洗多次或調(diào)整細(xì)胞消化的操作。
5、培養(yǎng)溫度及CO2濃度的偏差可能影響到細(xì)胞的收獲率,需密切關(guān)注培養(yǎng)過程中的溫度和CO2濃度設(shè)定值是否滿足需求。
雖然收獲細(xì)胞時過程略顯繁瑣,但細(xì)胞工廠培養(yǎng)面積大,占用空間小,還可以通過配套管路實(shí)現(xiàn)密閉培養(yǎng),降低細(xì)胞污染風(fēng)險(xiǎn)。這些優(yōu)勢也讓其成為生物制藥、疫苗、細(xì)胞與基因治療產(chǎn)品研發(fā)與生產(chǎn)中不可或缺的工具。
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