我們?cè)谑褂?/span>細(xì)胞工廠在培養(yǎng)Vero細(xì)胞時(shí)的注意事項(xiàng)有以下四點(diǎn):
(1)保證細(xì)胞來(lái)源可靠,并檢測(cè)有無(wú)支原體及外源病毒污染。
(2)細(xì)胞連續(xù)傳代次數(shù)有限,需采用低代次細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。
(3)每次傳代使用新的細(xì)胞工廠。
而在細(xì)胞工廠培養(yǎng)培養(yǎng)過(guò)程異常處理
(1)培養(yǎng)過(guò)程中盡可能分開(kāi)進(jìn)行種細(xì)胞傳代。
(2)如遇細(xì)胞培養(yǎng)中培養(yǎng)液渾濁,請(qǐng)選擇當(dāng)天不進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的房間進(jìn)行取樣鏡檢,鏡檢下有明顯游動(dòng)的微生物則很可能是細(xì)菌污染,若不是特別明顯可取一些培養(yǎng)液在TSA平板中培養(yǎng)24-72h觀察。
(3)如遇培養(yǎng)液清澈,但細(xì)胞生長(zhǎng)明顯受限或死亡,請(qǐng)選擇當(dāng)天不進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的房間進(jìn)行取樣,進(jìn)行支原體或外源病毒檢測(cè)。
(4)確定污染后務(wù)必棄去所有污染細(xì)胞、停用使用中的培養(yǎng)基,對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境進(jìn)行徹底消毒滅菌后再進(jìn)行下批實(shí)驗(yàn)。