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細(xì)胞搖瓶中的細(xì)胞什么時(shí)候進(jìn)行傳代
發(fā)表日期:2022-11-11

細(xì)胞傳代是細(xì)胞培養(yǎng)過程中的一步重要操作,它是指將細(xì)胞從原培養(yǎng)體系轉(zhuǎn)移到新鮮的生長培養(yǎng)基中,使細(xì)胞進(jìn)一步增殖。貼壁細(xì)胞可以通過鏡下觀察,判斷傳代時(shí)機(jī),而在細(xì)胞搖瓶中培養(yǎng)的懸浮細(xì)胞無法通過顯微鏡觀察細(xì)胞密度,那該如何判斷傳代時(shí)機(jī)呢?

細(xì)胞搖瓶中的細(xì)胞什么時(shí)候進(jìn)行傳代

細(xì)胞的生長會經(jīng)過四個(gè)階段:遲緩期、對數(shù)生長期、穩(wěn)定期、衰退期,無論是貼壁細(xì)胞還是懸浮細(xì)胞,都是在進(jìn)入對數(shù)生長期,未達(dá)到混合狀態(tài)的時(shí)候進(jìn)行傳代,這個(gè)時(shí)期的細(xì)胞生長迅速,呈指數(shù)勢增長。由于懸浮細(xì)胞無法通過鏡下觀察細(xì)胞搖瓶中的細(xì)胞密度,可以在細(xì)胞生長初期繪制生長曲線,以此來判斷傳代時(shí)機(jī)。

細(xì)胞生長曲線是測定細(xì)胞絕對生長數(shù)的常用方法,也是判定細(xì)胞活力的重要指標(biāo),是培養(yǎng)細(xì)胞生物學(xué)特性的基本參數(shù)之一。一般細(xì)胞傳代之后,會經(jīng)過短暫的遲緩期,隨后度過長短不同的潛伏期,即進(jìn)入大量分裂的指數(shù)生長期。在細(xì)胞達(dá)到飽和密度后,停止生長,進(jìn)入平頂期,然后退化衰亡。

確定傳代時(shí)機(jī)后,細(xì)胞搖瓶中的懸浮細(xì)胞傳代一般通過稀釋方式進(jìn)行,用吸管吸棄細(xì)胞懸液 1 / 2~1 / 3,加入適量的新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

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