貼壁培養(yǎng)是常見的一種培養(yǎng)方式,一般會用到細(xì)胞培養(yǎng)方瓶這樣的細(xì)胞耗材,細(xì)胞會貼附在細(xì)胞培養(yǎng)瓶的表面上進(jìn)行分裂生長,但是有的時(shí)候會出現(xiàn)細(xì)胞不貼壁的情況,這是什么原因呢?
細(xì)胞不貼壁原因分析:
1. 胰酶消化時(shí)間把控不當(dāng):消化不夠細(xì)胞本身就是成團(tuán)的;若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞膜蛋白損傷,使細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重時(shí)甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。
2. 缺少貼壁因子:血清中含有促貼壁因子,而無血清培養(yǎng)基工藝中由于缺少這種促貼壁因子,細(xì)胞的貼壁效果會下降很多。
3. 支原體或細(xì)菌的污染。
4. 復(fù)蘇的細(xì)胞本身狀態(tài)不好,已經(jīng)老化,失去貼附性。
5. 接種細(xì)胞數(shù)目太少,無法分泌足夠的細(xì)胞外基質(zhì)。
以上是使用細(xì)胞培養(yǎng)瓶等容器出現(xiàn)細(xì)胞不貼壁的幾個(gè)常見原因,大家可針對具體情況進(jìn)行處理,讓細(xì)胞能夠貼壁培養(yǎng).