細(xì)胞支原體污染是培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)讓人非常頭疼的問(wèn)題,尤其是使用細(xì)胞工廠這種大規(guī)模培養(yǎng)容器,一旦發(fā)生支原體污染,損失更加慘重。那么,出現(xiàn)支原體污染的原因是什么呢?
支原體是一種大小僅為0.2~0.3 um,無(wú)細(xì)胞壁,可透過(guò)一般過(guò)濾膜(0.22-0.45 um)的原核生物,在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%,因而細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中被支原體污染是一個(gè)世界性的難題。當(dāng)細(xì)胞(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染后,細(xì)胞內(nèi)的DNA、RNA及蛋白表達(dá)發(fā)生改變,而細(xì)胞的生長(zhǎng)率一般并未發(fā)生顯著的影響,因而細(xì)胞被支原體污染一般難以察覺(jué)。
多數(shù)情況下細(xì)胞病理變化輕微或不顯著,細(xì)微變化也可由于傳代、換液而緩解,因此易被忽視。但個(gè)別嚴(yán)重者,可致細(xì)胞增殖緩慢,甚至從細(xì)胞工廠脫落。
如果細(xì)胞工廠內(nèi)的細(xì)胞出現(xiàn)支原體污染,主要是以下四方面原因:
1.細(xì)胞之間交叉污染;
2.細(xì)胞培養(yǎng)操作人員的口腔、皮膚等;
3.工作環(huán)境或?qū)嶒?yàn)器材的污染;
4.培養(yǎng)基的污染。
以上是細(xì)胞工廠內(nèi)出現(xiàn)支原體污染的幾種原因,要避免這種情況的出現(xiàn),我們需要注意,不要一次操作兩種不同的細(xì)胞,注意無(wú)菌操作及個(gè)人衛(wèi)生等,確保培養(yǎng)基的質(zhì)量。